色谱仪 高效液相色谱仪与气相色谱仪的比较
一.流动相方面:
1.高效液相色谱仪
(1)液体流动相可以是离子型.极性.弱极性.非极性溶液。
(2)液体流动相不仅在运输样品方面发挥作用,而且对样品组件具有一定的亲和力(除阻力色谱除外)。它将与固定阶段展开组件的激烈竞争,与被分析的样品相互作用,提高分离的选择性。因此,它在分离中起着很大的作用。
(3)液相动力粘度为10-a·s,运输流动相压力高达2~20MPa。
2.气相色谱仪
(1)气体流动相为稀有气体,不与分析样品相互作用,它只起运输样品的作用,一般对分离结果的优劣没有影响。
(2)气体流动相的动力粘度为10-5Pa·s,运输流动相压力仅为0.1~0.5MPa
二.固定相方面:
1.高效液相色谱仪
(1)分离机理:可以依据吸附.分配.筛析.离子交换.亲和等各种原则进行样品分离,可选择多种固定相。
(2)固定相粒度小于5~10um;填充柱内径3~6mm;柱温为103~104,柱温为常温。
2.气相色谱仪
(1)分离机理:基于吸附.样品分离采用两种原则,可供选择的固定相类型较多。
(2)色谱柱:000固定相粒度.1~0.5mm;柱内径为1~4mm,柱长1~4m,102~103毛细管柱内径为0.1~0.3mm,柱长10~100m,103~104柱温度为常温~300℃。
三.检测器:
1.高效液相色谱仪
(1)选择性检测器:紫外可见检测器.二极管列阵检测器.莹光检测器.电化学检测器激光诱导英光检测器。
(2)通用型检测器:挥发激光透射检测器.折光示差检测器
2.气相色谱仪
(1)选择性检测器:电子捕获检测器.氮磷检测器.火苗亮度检测器
(2)通用检测器:热导检测器.火苗离子化检测器
四.仪器的组成
1.高效液相色谱仪:溶质在液相中的扩散系数(10-5)cm2/s)它很小,所以色谱柱外的死空间应该尽可能小,以便尽可能小
减少柱外效应对分离效应的影响。
2.气相色谱仪:气相中溶质的扩散系数(10-10cm2/s)大,使用填充色谱柱时,柱外效应的影响较小,
但对于毛细管色谱柱也应尽量减少柱外效应对分离效果的影响。
五.操作条件
1.柱温:高效液相色谱仪一般在室温下运行,气相色谱仪必须根据样品设置色谱柱温度。
2.高效液相色谱仪的流动相比气相色谱仪的流动相慢一个量级以上。
3.液体的粘度是气体的100倍,密度是气体的1000倍,所以高效液相色谱仪具有很高的柱前压力。
4.气体可以压缩,气相色谱仪利用压缩气体的受控释放作为流动相的动力;但是液体不能压缩,
所以高效液相色谱仪只能用高压输液泵作为流动相的动力。
5.高效液相色谱仪样品回收更容易,并且可以大规模制备;气相色谱仪样品大多会被破坏。
6.决定气相色谱仪分离好坏的主要操作条件是固定相.流动相流速和柱温度;固定相相的主要操作条件是高效液相色谱仪的分离.流动相和流动相的组成。
7.在处理复杂样品时,气相色谱仪可采用柱温程序加热法分离成分;高效液相色谱仪采用梯度洗脱法
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